GC-EAD昆虫触角电位仪操作流程

一、准备实验材料

（1）状态良好的昆虫；

（2）根据实验目的，准备待刺激物质；

（3）吸附刺激物的滤纸；

（4）放置刺激物的巴氏德玻璃管或者蓝色枪头；

（5）生理盐水；

（6）酒精灯等其他实验材料。

设备组成部分：IDAC-2信号采集控制器一台；CS-55刺激气流发生器一台；MP-15显微操作器一套，含一对微操、底板和味管固定器；combi Probe探头一个；EC气相物质加热系统，屏蔽柜一个；工具盒：一把手术刀、两把镊子、一把剪刀、切管用陶瓷片、保存银丝且内含乙醇的小瓶等。

二、测量流程

（1）打开GC，选好方法至等待进样运行；

（2）打开EC气相物质加热系统为加热管加热；

（3）查看洗气瓶中纯水的液位是否为一半，不足补充；打开CS-55刺激气流发生器电源；

（4）检查软件连接，打开电脑上GCead，IDAC-2信号采集控制器的左上角的指示灯即可打开，如果不亮，可以尝试重启软件或者拔插一下IDAC-2的USB线再打开软件；

（5）准备昆虫触角，触角的准备方式没有标准模式，可以使用活虫但是需要牢牢固定虫体，避免影响基线的稳定性；也可以剪单只触角，带头的触角或其他形式，具体采用哪种形式，以基线稳定为准。

搭触角方式分两种：一种为导电胶连接方式，将导电胶在金属叉上薄薄涂一层，然后将触角的基部（接头部分）搭在参考极，触角的端部（触角远端）搭在测量极（一般为有胶带标记的一头），最后再盖一层导电胶，避免导电胶过快干燥，影响测量；另一种为玻璃电极连接方式，根据触角的两端直径准备直径相当的两根玻璃毛细管，吸入生理盐水，用滤纸擦干毛细管管壁外的生理盐水，管中不能有气泡及其他小杂质，否则需要重新更换生理盐水，管中液面为距离管尾部3mm以上，同时将玻璃电极夹持头中插入银丝，头部超过夹持头3mm，尾部稍微折弯，然后固定到显微操作器上相应的位置。用吸了生理盐水的玻璃毛细管尖部轻轻吸住触角的基部，从玻璃毛细管尾部插入参考极一端的玻璃电极夹持头，测量极插入另一根吸入了生理盐水的玻璃毛细管，控制微操使测量极一端玻璃毛细管的尖部和触角尖部连接。为了得到信噪比良好的信号，尽可能多的暴露感器，且不能夹伤、冷冻或者破坏感器，可在实验前做电镜了解触角感器分布。

（6）关闭屏蔽柜，点击GCead软件的record显示实时谱图，基线稳定后，从GC进样，GCead软件会自动进入记录窗口，会按照设置自动停止记录，或者按record下stop and save；记录完毕后，再次点击record显示实时谱图，搭第二根触角，开始第二个记录。

三、关机

测量完毕后，关闭软件和电脑，将电极叉擦干净，银丝电极浸泡在乙醇中，味管和玻璃电极夹持头要定期超声波清洗，以备后期正常使用。最后关闭刺激气流发生器电源，关闭屏蔽柜，收好工具；按照GC关机流程关闭GC；最后关闭EC气相物质加热系统。

四、注意事项

（1）安装或者拆卸电极叉或者玻璃电极的测量极一端的夹持头时，务必将手接触屏蔽柜，将身体干扰排除，否则combi探头易遭破坏；

（2）要时常检查接地系统是否连接正常：包括底板和屏蔽柜间连线、主气路和刺激气路上接地线。

（3）基线不好或者对照变大，说明系统有污染，需要清洗和维护，包括更换气体管路，清洗味管、玻璃电极夹持头，并且刺激气流发生器后面的活性炭要定期活化，温度200度烘箱中活化一个小时。